不同仪器不同测定方法检测血清总胆红素引发的思考

前言：

血清总胆红素是一项常见的生化指标，用于评估黄疸等肝功能异常情况。它是由肝脏代谢和胆囊排泄的一种物质，过高的血清总胆红素水平可提示胆红素代谢紊乱或者肝功能受损。为确保准确的检测结果，医学实验室通常使用不同的方法来测定血清总胆红素。随着不断的科技进步，现在有多种测定方法可供选择，例如钒酸盐氧化法和重氮法等。这些不同的测定方法可能会导致结果的差异，因此我们需要对所选择的仪器和测定方法进行认真的考虑和评估。在本文中，将以一个关于血清总胆红素检测的案例分析为例，探讨不同仪器和测定方法对结果的影响，以及在此过程中可能出现的问题和思考。

案例经过

患儿性别：女，年龄：1月，于2023年10月16日11:17前往医院A儿保科就诊，主要症状为黄疸。在初步诊断为迁廷性黄疸后，医生要求患儿进行抽血检查。血清总胆红素的检测结果为449.1 umol/L（钒酸盐氧化法），参考范围为2.0-20.5 umol/L。

随后，患者的家属将患儿带到医院B门诊部就诊，并要求进行住院治疗。门诊医生拟定为“黄疸”收住院进一步治疗。住院部医生在2023年10月16日20:13重新进行了血液检查，并对总胆红素进行了复查。医院B检测的结果显示，患儿的总胆红素为316.1 umol/L（重氮法），参考范围为3.42-20.5 umol/L。对比之前患儿在医院A血清总胆红素的检测结果，住院部医生对此结果产生了怀疑，并联系检验科，认为本院的总胆红素检测结果差异比较大。

为了进一步核实结果的准确性，医院B于2023年10月17日将患儿在入院当天抽取的血清带到医院A再次进行检测。医院A的检测结果显示，患者的总胆红素为380.1 umol/L（钒酸盐氧化法），参考范围是2.0-20.5 umol/L。与医院B的检测结果相比，两个结果存在较大差异。

经核实，医院A采用的总胆红素测定剂盒生产批号：230703，有效期至：2024-07-02。胆红素校准品生产批号：230317有效期至：2024-03-16，均由某生物技术股份有限公司提供。医院B采用的总胆红素测定剂盒生产批号：68635901，有效期至：2024-08-31。胆红素校准品生产批号：(10)59516301有效期至：2024-07-31，均由某诊断有限公司提供。两家医院总胆红素的项目校准和定标，当天的质控以及仪器运行情况等都是正常的，不存在异常情况。

这一系列的病例经过引发了我们对血清总胆红素检测的思考。不同医院对血清总胆红素的检测结果存在差异，这可能涉及到不同的仪器和测定方法，以及样本处理等因素。在进一步的分析中，我们将深入探讨两家医院检测结果存在较大差异的原因。通过对该案例进行细致的阐述和分析，可以更好地理解各种因素对检测结果的影响。

案例分析

简单介绍不同仪器使用不同测定方法检测血清总胆红素:

1. 医院A使用全自动生化分析仪AU480和AU400，该仪器采用钒酸盐氧化法

钒酸法：在pH=3的条件下，血清胆红素可经钒酸氧化成胆绿素，从而使胆红素特有的黄色减少，可根据加入钒酸前后450nm处吸光度的下降与血清胆红素呈正比。该法也是临床常用的生化检测方法之一，简单、快速、稳定，线性范围宽，能抵抗溶血、血脂干扰。[1]

2.医院B使用C702-2全自动生化分析仪，该仪器采用重氮法的测定方法

重氮法：在强酸（pH 1-2）条件下，胆红素和重氮离子偶联，形成有颜色的偶氮化合物，重氮胆红素显色的强度与胆红素浓度呈比例，光电比色测定。优点：可直接比色，手续简单、易于自动化。缺点：重氮试剂不稳定，须由亚硝酸钠和氨基苯磺酸临时生成；易受溶血、脂血等因素干扰，胆红素浓度过高时影响准确度。[2]

总而言之，重氮法和钒酸法是两种不同仪器使用的测定血清总胆红素的方法。重氮法适用于简单、自动化的操作，但其重氮试剂的稳定性和对干扰因素的敏感性需要考虑。而钒酸法则具有简便快速、稳定性好的优点，并且能够抵抗溶血、血脂等因素的干扰。在选择均符合实验需求的方法时，可以结合实际情况进行选择。

接下来，讨论两家医院检测血清总胆红素存在差异的原因:

血清总胆红素的测定是通过不同的方法和仪器来进行的，其中包括钒酸盐氧化法和重氮法。这两种方法在测量原理、样本处理和标准范围上存在差异，导致测量结果的存在差异。两家医院检测血清总胆红素存在较大的差异可能由多个因素引起。

首先，仪器差异是造成不同医院检测结果差异的一个重要因素。不同的仪器具有不同的灵敏度、准确度和稳定性。不同仪器使用的检测方法和标准存在差异。钒酸盐氧化法和重氮法在原理和标准范围上有所不同。医院B使用了不同仪器和不同检测方法，就会导致检测结果与医院A的结果存在较大差异。

其次，在检验科工作中可能存在的误差和偏差也可能导致结果不一致。例如，实验室操作人员的技术操作水平和经验也是结果差异的一个潜在因素。不同实验室操作人员的技术水平和严格遵守操作规程的程度可能存在差异，进而影响结果的准确性。

此外，样本处理和保存：样本在采集、运输、保存等过程中可能受到环境和时间的影响。不同实验室可能有不同的样本处理和保存方式，这也可能导致结果的差异。

案例总结

综上所述，在本案例中，我们针对一例血清总胆红素测定结果存在较大差异的病例进行了详细分析。通过比较不同仪器不同测定方法的检测结果，针对不同仪器不同测定方法的检测原理和操作过程进行了较为全面的阐述和分析。

我们发现 C702-2和AU480、AU400使用的测定方法不同，导致了不同的血清总胆红素测定结果。C702-2采用重氮法进行测定，而AU480和AU400采用钒酸盐氧化法进行测定。这两种方法在测量原理、试剂选择、操作步骤等方面存在差异，可能导致了结果的差异。此外，我们还讨论了其他可能影响结果的因素，包括不同实验室操作人员的技术水平，样本采集、处理和保存等。这些因素可能会对血清总胆红素测定结果产生一定影响，并需要在实际操作中予以考虑和纠正。

通过全面的分析和讨论，有助于加深对血清总胆红素检测的理解，并提醒实验室人员在实际工作中注意操作规范和质量控制，以确保结果的准确性和可靠性。不同的仪器和不同的测定方法在原理和标准范围上有所不同都会对血清总胆红素的检测结果造成影响，因此在解释和比较不同医院提供的检验结果时，需要综合考虑这些因素以尽可能准确和可靠地得出结论。

以此，提醒临床医生根据临床情况综合分析，避免仅依靠检验结果做出诊断或治疗决策。建议临床与检验科室之间加强沟通与协作，共同研究和解决疑难问题，以提高检验结果的准确性和临床应用的指导性。

参考文献:

[1]曹永坚,李笑平,罗强.改良重氮法和钒酸盐氧化法测定胆红素结果比较[J].检验医学与临床,2009,6(09):710-712.

[2]曹永坚,李笑平,罗强.改良重氮法和钒酸盐氧化法测定胆红素结果比较[J].检验医学与临床,2009,6(09):710-712.

作者：龙国针    

指导老师：梁华铭   练小芬

单位：新兴县妇幼保健院检验科

编辑：伟